光片熒光顯微技術(shù)能夠以很高的三維分辨率對生物樣本進行長時間的、較為溫和的3D成像。特別是當該技術(shù)與高速照相機相結(jié)合時,就能夠快速地捕捉細胞或亞細胞水平上的動態(tài)變化。
從原理上來講,3D光片顯微技術(shù)與傳統(tǒng)的寬場顯微技術(shù)或共聚焦顯微技術(shù)有很大不同,后兩者需要照射或掃描成像目標物中的整個樣本,而光片顯微鏡只需要用薄層光(實際上為2D)從側(cè)邊照射樣本。隨后從樣本的上部或下部檢測所產(chǎn)生的熒光信號,檢測方向與薄層光線的照射方向相垂直。因此,該技術(shù)的光學層析能力(optical sectioning,即z層面上樣本結(jié)構(gòu)的分辨能力)不像共聚焦成像技術(shù)那樣取決于焦點處光子的采集,而是來自于在開始時每次僅激發(fā)一個層面上的熒光基團。換言之,光片顯微技術(shù)只會激發(fā)一個焦平面上或旁邊的分子,因此降低了光毒性,并且提高了長時間對活體樣本進行成像的能力?;?D光片熒光顯微鏡本身的技術(shù)特點,該系統(tǒng)滿足了快速、大體積3D成像、低光毒性及長時間成像的需要。
Phaseview 3D光片顯微成像系統(tǒng)應用領(lǐng)域:
1、模式動物整體3D成像:果蠅,斑馬魚,線蟲等;
2、動物器官3D成像:心臟、腦、眼、耳等器官發(fā)育;
3、神經(jīng)生物學研究:大腦和神經(jīng)活性的3D功能成像;
4、3D高分辨率、高速實時成像:透明化樣本3D成像、熒光標記的活體樣本的結(jié)構(gòu)特性、微弱熒光信號的高速3D成像;
5、3D細胞長時程培養(yǎng)實時成像;
6、免疫生物學研究:淋巴結(jié)成像,抗原抗體成像等;
7、形態(tài)和發(fā)育生物學研究:胚胎成像;
8、細胞動態(tài)過程的快速成像,例如:細胞遷移、血流、血管發(fā)育、Ca2+成像;
9、海洋生物熒光成像:海鞘、魷魚、浮游生物及扁形蟲;
10、植物生物學研究:觀察敏感的發(fā)育過程和執(zhí)行生理測量;
11、藥物藥理毒理及藥代動力學研究。